一種在菌落總數測定中防止芽胞桿菌 菌落彌漫生長的方法
發布時間：2022-02-24 瀏覽次數：2397
來源六扇門Study，本文所用部分圖片源于互聯網，版權歸屬原作者所有。如有涉及版權問題，請及時聯系小編，協商刪除。
隨著食品工業發展，食品種類越來越多，生產原料品種越來越廣，加工工藝也越來越復雜，但微生物的污染仍然無法避免，特別是糕點、面點等含高淀粉類食品受芽胞桿菌污染的機率大，加工過程中難以徹底滅菌，菌落計數時瓊脂平板上就會出現菌落彌漫生長的現象，導致菌落難以計數，對菌落總數檢驗項目的準確性造成嚴重的干擾。
需氧細菌的新陳代謝作用能將 2，3，5 － 三苯基氯化四氮唑（TTC）還原為紅色的三苯甲臢（TPF），使得菌落呈紅色，故可以將 TTC 作為細菌生長的指示劑，同時 TTC 對細菌的生長有一定的抑制作用。因 此，可以利用 TTC 這一特性，尋求抑制菌落彌漫生長的有效方法，便于菌落計數。
鄭連寶，陳文祥，嵇林風等取適宜稀釋度的枯草芽胞桿菌（ Bacillus subtilis）、蠟樣芽胞桿菌（Bacillus cereus）、大腸埃希菌（Escherichia coli） 、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），在平板計數瓊脂培養基【平板計數瓊脂（PCA）培養基】中分別添加 0.01% 、0.05% 、0.08% 、0.1% 、0.2% 、 0.3% 、0.4% 、0.5% 、0.8% 、1.0% TTC 水溶液，同時以不添加 TTC 的計數瓊脂培養基作為對照，觀察細菌的生長狀況。結果 TTC 濃度為 0.2% ～ 0.3% 時，能有效防止枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌在計數瓊脂培養基上出現菌落彌漫生長，同時對大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的生長無顯著影響。
不同濃度 TTC 對細菌生長的影響
當枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌液稀釋濃度分別為 10 － 5 和 10 －6時，菌落數在適宜計數范圍( 30 cfu/ml ～300 cfu/ml) 。
從表 1 可知，不同濃度 TTC 對細菌生長呈現不同的抑制效果。低濃度 TTC 對菌落總數計數無顯著影響。
不同濃度 TTC 對枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態的影響
由圖1和圖2所示，不同濃度 TTC 對枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態也呈現出 3 種狀態。
TTC 濃度為 0.2% ～ 0.3% 時，菌落顏色愈紅，菌落形態與直徑大小接近對照組，但計數平板上菌落彌漫生長現象基本消失。
綜上所述，TTC 濃度為 0.2% ～ 0.3% 時，能有效防止枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌在計數瓊脂上出現菌落彌漫生長，同時對細菌的生長無顯著影響，而覆蓋法防止菌落彌漫生長的效果欠佳。因此，食品微生物檢驗中測定菌落總數時，遇到易受芽胞桿菌污染的食品，可在瓊脂中加入 0.2% ～ 0.3% 的 TTC 防止菌落出現彌漫現象而導致無法計數的情況發生。
內容來源：鄭連寶,陳文祥,嵇林風,章小洪,丁琦,施華標.一種在菌落總數測定中防止芽胞桿菌菌落彌漫生長的方法[J].中國衛生檢驗雜志,2019,29(22):2715-2717.
