何時用瓶皿培養，何時用孔板培養
發布時間：2023-08-09 瀏覽次數：595
細胞的體外培養需要依附在人工附著物上，大多數脊椎動物細胞在人工附著物上會呈現為單層生長的狀態。
所謂的人工附著物，就是常見的多孔板、培養瓶、培養皿。
用什么類型的附著物來培養細胞，是有什么依據的呢？這一期內容就講講這個話題。
基本概念
從材料分類上看，常見的細胞培養附著物分為一次性的塑料和玻璃。
先說玻璃，成本低、可重復使用，透光性好，但由于其清洗過程復雜，不易保存，現在已逐漸被一次性塑料取代了。
一次性塑料的主要成份是聚丙乙烯，由人工合成，質地均勻，產量大成本低，能為細胞提供一個良好的生長表面。
這里有一個小細節，有的塑料培養器皿會標注“已表面處理“，這是什么意思呢？
因為聚丙乙烯生產好以后，其表面是疏水性的，這不利于細胞貼壁生長，因此，需要進行特殊的工藝處理，例如射線照射、電離輻射，這樣處理過的表面細胞才能更好的貼在上面生長。
選擇器皿的原則
選擇用多孔板培養細胞還是培養瓶培養細胞，是根據你培養細胞的目的來決定的。
如果培養細胞的目的是通過細胞倍增，最終獲得大量細胞或細胞分泌物，則應該使用培養瓶、培養皿來培養細胞；
如果目的是為了進行微量的、多次的重復實驗來分析細胞或細胞產物，則應該使用多孔板來培養。
確定培養目的以后，應該根據具體情況選擇不同規格的器皿。以下分類說明。
1 選擇培養瓶、培養皿培養細胞
首先，根據期望獲得的細胞產量來選擇，培養瓶是通過表面積來命名的，例如T25、T75、T175，數字就是表面積，25就是25cm2，如此類推；
培養皿是按照其直徑來命名的，例如3.5cm、9cm。以下，是按照不同規格的培養器皿所能培養的細胞數量繪制的參考圖，有興趣的同學可以保存下來以后用。
其次，根據實驗操作熟練程度來選擇，培養皿的操作比較方便，不管是換液、傳代、還是收獲細胞，但因為其開口很大，所以容易污染，如果你是新手，不建議直接用培養皿養細胞。
最后，如果選擇培養瓶培養，還應該盡量選擇有斜肩設計、帶透氣孔瓶蓋的型號。
前者可以避免培養瓶平放后，過多的培養基接觸瓶蓋造成污染，后者可以保持內外的二氧化碳濃度一致。
如果瓶蓋不透氣，那在放進培養箱時，應擰松一圈，以便內外氣體能順利交換。
2 選擇多孔板培養細胞
首先，也是要判斷你的實驗需要多少細胞來進行分析，以此來選擇多孔板的規格。大家同樣可以參照上面的圖表。
有極個別的孔板，孔底部是錐形底或圓底，這種規格的多孔板適用于非組織型的細胞培養，對于大多數貼壁生長的細胞來說不適合。
選擇好合適的孔板后，在培養階段，有2點注意事項：
A 多孔板會帶板蓋，但其密封性不好，在培養箱內會造成邊緣的孔位蒸發效率過高，進而影響細胞生長速率。
有條件的同學，可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位，并采用添加培養基來代替。
B 當細胞種入孔內以后，不應該再進行過多的震動，例如晃動、抖動培養板，而應該輕緩的放入培養箱中。
如果培養箱由多人共用，還應該考慮大家頻繁開關箱門、拿放孔板造成的震動，這些不利因素都應該盡量減少。
來源：“ 實驗老司機”公眾號，作者-樊振華。
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