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速遞！2025版GB4789.3/GB4789.30/GB4789.38標準修訂亮點

發布時間：2025-03-28    瀏覽次數：699

好消息！好消息！大家期待已久的《GB?4789.3-2025 食品微生物學檢驗?大腸菌群計數》《GB?4789.38-2025??食品微生物學檢驗?大腸埃希氏菌計數》《GB?4789.30-2025??食品微生物學檢驗?單核細胞增生李斯特氏菌檢驗》終于在這春暖花開的季節發布了，新標準修訂內容不僅體現了國內標準與國際標準接軌的趨勢，而且使標準方法操作和結果報告處理更加靈活簡單又快捷。為了方便大家快速清晰地了解這些新變化，小編梳理了一下這三個標準修訂內容的亮點，具體見下表：

標準 修訂內容
GB 4789.3-2025 大腸菌群計數

亮點一、創新：增加了大腸菌群測試片法，并明確測試片應以發酵乳糖產酸產氣為陽性結果判斷依據，且性能符合 GB4789.28 中相關培養基的質量要求。 
亮點二、靈活：液體樣品稀釋明確了當樣品不適宜進行體積取樣時，按 6.1.1 固體和半固體樣品稱重操作。 
亮點三、省時：MPN計數法 復發酵試驗培養時間由“ 48h±2h ”修改為“ 24-48h ”，若最短培養時間內得到陽性結果，則檢驗周期可縮短 24h。
亮點四、全面：
1）在平板法 9.2 接種與培養中增加“對于乳及乳制品，應置于 30℃±1℃ 培養 18h~ 24h 。”這是基于國內外文獻報道，培養溫度為 30 ℃ 時乳制品中大腸菌群平板計數的結果，顯著高于培養溫度為 36 ℃ 的計數結果，在國外相關標準中已將乳制品中大腸菌群平板計數培養溫度規定為 30 ℃ 左右，以及修標單位經調查研究和實驗驗證后，作出的修訂。
2）明確MPN 計數法初發酵試驗，如接種體積超過 1mL ，則加到等體積的雙料LST肉湯中；
3）MPN 計數法初發酵試驗陽性結果描述由“ 觀察倒管內是否有氣泡產生 ”修改為“ 小倒管或產氣收集裝置內有氣泡產生，或輕輕振搖 LST肉湯管 可見試管內有細密氣泡不斷上升者，判斷為產氣”，更加詳細明了。
4）MPN計數法 的結果與報告增加“ 附錄C 確定最適的 3個連續稀釋度方法”，平板法的結果與報告增加“ 附錄D 規定了大腸菌群菌落數的計算、數值修約和結果報告的方式，并給出了相關示例。”，新增附錄讓實驗結果處理變得簡單。

GB 4789.30-2025 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗

亮點一、與國際接軌：
 1）參照 ISO 方法和經起草組驗證，將 定性檢驗 和 MPN法 中的選擇性增菌液體培養基由 LB1 和 LB2 修改為“ Fraser增菌肉湯(FB1、FB2)”；選擇分離顯色培養基“李斯特氏菌顯色平板“修改為“OA李斯特氏菌顯色平板”并在 附錄A 培養基和試劑中增加了 OA李斯特氏菌顯色培養基配方。
2）參照 ISO 等國際、國家標準，將平板計數規則“ 所有平板菌落數合計在  15CFU ～ 150CFU 之間的平板，計數典型菌落數。”修改為“所有平板典型和可疑菌落數合計在 15CFU ～ 150CFU 之間的平板，計數典型和可疑菌落數。”經驗證可提高結果的穩定性。
亮點二、實惠省時：
 1）結合我國現行有效的與單增李斯特菌限量指標相關的標準將平板計數，“ 8.2 樣品的接種 ”將原來“ 每個稀釋度的樣品勻液分別吸取 1mL 以 0.3mL、0.3mL、0.4mL 的接種量分別接種 3塊李斯特氏菌顯色平板”修改為“ 每個稀釋度分別吸取 0.1mL 樣品勻液，接種1個 OA李斯特氏菌顯色培養基（或其他等效的李斯 特氏菌顯色培養基）平板 ”，大大減少了顯色培養基的用量，又能滿足現行產品標準需要。同時繼續保留“ 0.3mL、0.3mL、0.4mL 涂布法”，滿足檢出限更低的需求和方法的延續性。
2）在“ 5.5 鑒定 ”中增加“ 如選擇生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統，可不經 5.4 初步鑒定，直接從 TSA-YE平板或羊血平板上挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當的菌懸液，使用微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化 鑒定系統進行鑒定。”結合使用生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統實際情況，優化鑒定流程，縮短檢驗時長。
亮點三、嚴謹：
 1）在 8.2 樣品的接種中增加“ 8.2.3 從樣品稀釋至樣品接種完畢不得超過 45min。”避免操作時間過長影響計數結果。
2）在“ 5.2 分離 ”中增加顯色培養基菌落識別注意事項（避免假陰性和假陽性結果）：

“注1：一些單核細胞增生李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養基上的菌落周圍的暈圈不明顯甚至沒有暈圈。還有一些單核細胞增生李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養基上的菌落周圍的暈圈出現得比較遲緩，有時需要 4d 以上才出現。
注2：伊氏李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養基上的菌落形態與單核細胞增生李斯特氏菌相似。”

GB 4789.38-2025 大腸埃希氏菌計數亮點一、與國際接軌：參考 ISO 方法和經起草組驗證，將大腸埃希氏菌MPN計數中復發酵陽性管劃線分離培養基 EMB 和平板計數 VRBA-MUG 修改為“ 胰蛋白胨膽鹽 X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂 ”，菌落觀察更加直觀清晰。并刪除了 MPN計數法“ 靛基質試驗、MR-VP試驗和檸檬酸鹽利用試驗 ”對分離平板上可疑菌落進行鑒定的內容，檢驗時長縮短至少 24h。
亮點二、嚴謹：
 1）刪除了術語和定義；增加了檢驗原理，并注明“ 絕大多數大腸埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性，但大腸埃希氏菌O157 等菌株沒有β-葡萄糖醛酸苷酶活性。另外，腸桿菌科內一些志賀氏菌、沙門氏菌等菌株也具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性。”
2）本新標準 MPN法中新增“ 對貝類及產品采用每個稀釋度接種 5管 LST肉湯的方法。”并且新增相應“ 附錄C 貝類及產品中大腸埃希氏菌最可能數(MPN)檢索表”。
3）MPN計數法 初發酵試驗陽性結果描述由“ 觀察倒管內是否有氣泡產生 ”修改為“ 小倒管或產氣收集裝置內有氣泡產生，或輕輕振搖 LST肉湯管可見試管內有細密氣泡不斷上升者，判斷為產氣”，更加詳細明了。

最后，環凱微生物為助力各食品微生物檢驗實驗室輕松應對新標準更新帶來的工作量和挑戰，現已整理出相應產品解決方案供選擇（見以下列表）！

HP002大腸菌群測試片結果判讀

培養：36°℃，培養24h

判讀：含有四氮唑指示劑，菌落為紅色，發酵乳糖產酸（黃色酸環）和產氣（伴有氣泡）。

CRM019 OA李斯特氏菌顯色培養基（單增菌落：藍綠色光滑規則小菌落，周圍有乳白色脂肪沉淀環）
CRM018A/CRM018 胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂培養基（大腸埃希氏菌菌落：藍綠色）

CRM019 OA李斯特氏菌顯色培養基（單增菌落：藍綠色光滑規則小菌落，周圍有乳白色脂肪沉淀環）

CRM018A/CRM018 胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂培養基（大腸埃希氏菌菌落：藍綠色）

GB4789.3-2025?大腸菌群計數產品解決方案

GB4789.3-2025 大腸菌群計數產品解決方案

GB4789.30-2025 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗產品解決方案

GB4789.30-2025 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗產品解決方案

GB4789.38-2025?大腸埃希氏菌計數產品解決方案

GB4789.3-2025 大腸菌群計數產品解決方案