影響細胞生長最常見的五類因素
發布時間：2023-07-21 瀏覽次數：2193
細胞生長狀態受多種因素影響，在培養細胞時，我們知道溫度不能過高也不能過低，有些細胞培養前還需要包被培養瓶，但實驗過程中我們很容易忽略這些小因素，導致細胞負傷慘重。
這些小細節究竟如何影響的細胞狀態？在培養時我們又該如何避免？本期整理了影響細胞生長最常見的五類因素，助您完美避坑！
01 細胞生長附著物
貼壁細胞在正常情況下都會貼壁，但某些細胞本身貼壁不牢或貼壁性差，而包被附著物能夠促進細胞的黏附，所以在培養一些特殊細胞時，需要對培養瓶/皿進行包被后使用。常用的基質有多聚賴氨酸（D型、L型）、明膠、膠原蛋白、細胞外基質混合物，培養時可根據需要自行選擇。
小貼士：細胞貼壁差時可使用基質包被培養瓶/皿。
02 細胞之間的接觸程度
正常細胞（二倍體）存在貼壁接觸抑制，長滿后細胞生長停止，而腫瘤細胞等非正常細胞，接觸抑制作用較弱，可生長至較高的細胞密度，但某些細胞一旦長過，其損傷難以逆轉，所以培養細胞時不建議細胞密度太高。
小貼士：無論什么細胞，都不能長滿再傳代，一般細胞匯合度達到70-80%即可傳代。
03 培養基PH值
大多數細胞系在PH7.4左右時生長最好，而常規培養基的指示劑為酚紅，所以多數情況下，我們所見的培養基都呈紅色，但不同培養基的顏色會有差異，例如DMEM比1640顏色深一點。在培養細胞時，也可以根據培養基的顏色判斷細胞狀態，如隨著細胞生長，pH值會變成黃色。
小貼士：培養時時刻關注培養基顏色變化，發現異常及時處理。
04 氣相成分
大部分培養基適合于95%空氣 5%CO2，但有部分培養基例外，如L15培養基適合于100%空氣，CO2會導致培養液PH降低（培養液變黃），嚴重影響細胞生長；若需要用L15培養基培養細胞，但沒有100%空氣培養箱時，可以擰緊瓶蓋或換培養基（效果可能更好）培養。適用于CO2環境的培養基需保持培養瓶透氣。
小貼士：培養細胞時注意參照說明書選擇培養基，并注意培養壞境。
05 培養溫度
對于大部分人源細胞和溫血動物細胞系來講，比較適宜的培養溫度是37℃，因為這個溫度接近體溫，但為了安全可以再稍低一些，高于體溫的溫度要比低于體溫的溫度更易產生問題。對于鳥類細胞，由于其體溫較高，所以培養溫度可以設置為38.5℃左右。
小貼士：培養細胞時保持溫度穩定，不要長時間敞開培養箱的門，并且不要將培養器皿大量重疊堆放在培養箱中，避免空氣不循環。
